ELISA试剂盒实验的一般步骤
ELISA试剂盒是继免疫荧光和放射免疫技能之后发展起来的一种免疫酶技能。它是以免疫学反应为根底,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种灵敏性很高的试验技能。以下是对ELISA试验的通用过程的简略阐明。
ELISA试剂盒试验通用过程:
(1)、要确保移液枪的精确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行判定。如果有专业人员进行纠正更好。
(2)、要装备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。提取不相同的液体后,要更换枪头。即使是提取规范品时也相同。要在试验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都康复到室温,以使作用更安稳。
(3)、试验时,要使底物避光储存。
(4)、用枪提取液体时速度不能太快,防止生成气泡而使提取量不精确。
(5)、提取液体时,要用量程和需要量附近的枪去吸,减小误差数值。
(6)、将液体加到酶标孔中时,防止枪头和孔内液体触摸,可使枪头上的液滴和孔壁触摸,液滴会天然流下去。
(7)、液体悉数加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻摇晃30秒,是液体平缓均匀。也可以用酶标仪的晃动功用。
(8)、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸腾。
(9)、洗板时,每次洗液参加后,应静置1分钟,使清洗愈加完全。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
(10)、洗液不行时,可用蒸馏水自行制造PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,参加0.1%的吐温20作为洗液。参加1/1000的叠氮钠后可长时刻保存。
(11)、底物是光灵敏的,需要在临用前现配。
(12)、检测前,要翻开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
(13)、底物有必定的毒性,间断液对皮肤有腐蚀性,应尽量防止触摸。
(14)、待检样品要弄清,否则会影响作用的精确性。
(15)、温浴时刻应遵从试剂盒规则。
(16)、应尽量做双孔试验,这样才调确保数据的精确性。
(17)、ELISA试剂盒对作用有疑问的样品要用其它办法进行确证。